以下是生物發(fā)酵pH計使用中的關(guān)鍵注意事項,分步驟說明以確保測量準確性與設(shè)備壽命:
一、安裝與校準
電極安裝位置
避開死角:安裝在發(fā)酵罐攪拌葉輪附近(距罐壁1/3處),確保液體流動,防止細胞/代謝物沉積。
角度傾斜:電極與水平面呈15°~30°,避免氣泡附著敏感膜。
校準規(guī)范
校準液選擇:使用pH 4.01、6.86、7.00緩沖液(發(fā)酵液接近中性,優(yōu)先校準6.86與7.00)。
校準頻率:每批次發(fā)酵前校準,連續(xù)運行72小時以上需中途復(fù)校。
二、抗污染與維護
污染類型與處理
污染源 清洗方案
蛋白質(zhì)/菌體 0.1%胃蛋白酶溶液浸泡30分鐘,純水沖洗
脂類/油污 中性洗滌劑(如Triton X-100)超聲清洗
無機鹽結(jié)晶 0.1mol/L HCl浸泡5分鐘,避免損傷玻璃膜
滅菌兼容性
在線滅菌:選擇耐高溫電極(如梅特勒InPro3250i,耐受140℃ SIP滅菌30分鐘)。
滅菌后操作:冷卻至50℃以下再校準,避免熱應(yīng)力導(dǎo)致漂移。
三、信號穩(wěn)定性保障
溫度補償
啟用自動溫度補償(ATC),確保Pt1000傳感器緊貼電極,誤差下于 0.02pH/10℃。
發(fā)酵過程溫度波動>5℃時,手動記錄溫度- pH關(guān)聯(lián)曲線。
抗干擾設(shè)計
參比電極優(yōu)化:使用凝膠電解液或開放式液絡(luò)部,防止菌體堵塞(如漢密爾頓EasyFerm Plus系列)。
屏蔽電纜:信號線與動力線間距>50cm,避免變頻器電磁干擾。
四、數(shù)據(jù)監(jiān)控與故障排查
異常響應(yīng)處理
現(xiàn)象 可能原因 解決方案
讀數(shù)漂移>0.1pH/h參比液污染或耗盡 更換參比電解液或電極
響應(yīng)時間>30秒敏感膜污染或老化 清洗或更換電極
無信號輸出 電纜破損或變送器故障 檢查接線,重啟變送器
數(shù)據(jù)記錄
每15分鐘記錄pH與溫度,繪制趨勢圖,發(fā)現(xiàn)異常波動(如±0.05pH突變)立即人工復(fù)核。
五、壽命管理與更換標準
電極壽命
常規(guī)使用:6-12個月(高蛋白發(fā)酵液壽命縮短30%)。
報廢指標:斜率<50mV/pH或零點偏移>±0.3pH(校準后無法恢復(fù))。
備件庫存
常備至少1支同型號電極,避免停產(chǎn)。
總結(jié):生物發(fā)酵pH計需“三防"(防污染、防干擾、防誤操作),結(jié)合定期校準與智能監(jiān)控,可提升發(fā)酵效率10%-20%。推薦使用帶自診斷功能的型號(如梅特勒M700),實時預(yù)警電極健康狀態(tài)。
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